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一、稀释尺度曲线样品（以 10E2- 10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例） 
。 由于尺度品浓度极度高 ，因而下列稀释操作肯定要在独立的区域进行 ，千万不能  传染样品或本试剂盒的其他成分） 
。为增长产品不变性和预防扩散传ran  xing病原 ， 本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传ran性的 DNA 片段作为阳性对照
。

        1.   象征 6 个离心管 ，别离为 7 ，6 ，5 ，4 ，3 ，2
。
        2.    用带芯枪头别离参与 45  μL 荧光 PCR 专用模板稀释液 ，用带芯枪头，

下同） 
。
3.   在 7 号管中参与 5  μL 1×10E8 拷贝/μL  的阳性对照(试剂盒提供)，充分震

      荡 1 分钟 ，得 1×10E7 拷贝/μL 的尺度曲线样品 
。放冰上待用
。

          4.   换枪头 ，在 6 号管中参与 5  μL 1×10E7 拷贝/μL  的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，
                得 1×10E6 拷贝/μL 的尺度曲线样品
。放冰上待用
。
          5.   换枪头 ，在 5 号管中参与 5  μL 1×10E6 拷贝/μL  的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，
                得 1×10E5 拷贝/μL 的尺度曲线样品
。放冰上待用
。

          6.   沉复上面的操作直到得到 6 个稀释度的尺度曲线样品 
。放冰上待用
。二、样品 DNA 的造备
          7.   若是有 N 个样品，设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品造备阳性
                对照），一个是 NC（样品造备阴性对照）
Ｄ芄挥 10μL 阳性对照的 10000
                倍稀释液再加上肯定量的水使总体积跟每次造备要求的体积一样 ，以此作为PC 
。另表用水作为 NC
。
          8.   用自选步骤纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大无数 DNA 提取试剂盒兼容 
。
                本产品的裂解液能够直接作为 PCR 模板，省略了 DNA 提取步骤
。

四、数据处置

      12. 若是把本试剂盒用于定量检测 ，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴 ， 以 Ct 值为纵轴 ，绘造尺度曲线 
。再以待测样品的 Ct 值从尺度曲线上推算出样品

RNA 浓度的 log 值 ，再推算出其浓度
。

      13. 若是把本试剂盒用于定性检测 ，只判断阳性或阴性 ，则阴性对照 Ct 必须大 于或蹬宗 40 
。阳性对照  必须有荧光对数增长 ，有典型扩增曲线 ，Ct 值应该 幼于或蹬宗 30 
。对待测样品 ，若是其 Ct 大于或蹬宗 40 则为阴性 ，若是幼 于或蹬宗 35 则为阳性 
。若是在 35-40 之间 ，则沉复一次 
。沉复尝试的 Ct

值若是大于或蹬宗 40 则为阴性 ，若是幼于 40 ，则为阳性
。